색소분리 보고서
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작성일 19-01-01 09:36
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결국 색소 혼합물에 들어있던 색소들은
이동속도의 차이에 의해 서로 분리된다
5. Materials& Methods
Materials
시금치 잎, 여과지(3MM), 모세유리관(또는 microtip), 막자사발, 전개액(페트롤리움에테르:아세톤=9:1),
아세톤, 시험…(drop) 관, spectrophotometer, 헤어드라이어, cuvette, pipette, polyglove
Methods
1. 광합성 색소의 분리
① 일정량의 시금치 잎을 아세톤 5ml에 넣고 막자사발로 곱게 간다
② 위의 추출물을 원심분리하여(2000rpm, 5분) 상등액을 따로 취한다
③ 여과지를 15cm 2cm 의 크기로 자른다.
2. paper chromatography
chromatography 는 혼합물의 분리분석, 화합물의 정제, 분자량의 측정(測定) 등에 사용되는 기술이다. 이때 점적한 부분이 가능한 작은 원이 되도록 한다.색소분리 보고서
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설명
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레포트/생활전문
색소분리 보고서
1. date
2013. 11. 07
2. title
잎의 색소 분리
3. objection
종이 크로마토그래피를 이용해 잎에서 색소를 분리하고 각 색소의 최대흡수 파장을 알아보자.
4. introduction
1. 광합성 색소
광합성은 엽록체라 불리는 식물의 특수한 기관에서 수행된다
엽록체의 thylakoid membrane 에는 빛 에너지를 흡수하는 광합성 색소들이 분포 되어있으며,
주요 광합성 색소들로는 chlorophyll a, chlorophyll b, carotenoid 등이 있다
엽록소(chlorophyll)는 빛 에너지를 흡수하는 주 색소이나 , 보조색소(carotenoid) 역시 빛을 흡수하고
에너지를 엽록소에 전달시켜 준다. 보조 색소를 이루는 것들로는 β-carotene, xanthophyll,
phycocyanin, 및 phycoerythrine등이 있따 광합성 색소들은 대부분 지용성 분자들로써 여러 가지
유기용매에 녹는 정도가 다양하며, 각기 특정한 파장의 빛을 흡수한다. 헤어 드라이어를 사용하여 완전히 말리고 다시 점적 하기를 반복한다
⑤ 여과지를 전개용매가 들어있는 시험관에 넣는다. 아래그림과 같이 한쪽 끝에서 1cm 되는 곳을 잘라 삼각형을 만들고 이곳으로부터 2cm 되는 곳에 연필로 선을 긋는다 (이때 여과지를 손으로 만지지 않도록 주의한다)
④ 모세관 또는 microtip을 이용하여 준비된 엽록소 추출액을 연필로 그은 선 중앙에 점적한다. 여과지가 시험관 벽면에 닿지 않도록 주의하고 전개용매 끝에서 0.5cm 정도만 잠기도록 한다
⑥ 전개액이 여과지 위에서 1cm 정도 남길때까지 전개되었을때 여과지를 꺼내어 전개액이 전개된 부분을 연필로 표시한 후 여과지를 완전히 말린다
⑦ 점적한 부분에서 가장 가까운 곳의 노란색을 띤 녹색 밴드가 엽록소 b이고 그위에 푸른색을 띤 녹색밴드가 엽록소 a이며 그 위쪽으로 xanthophyll, carotene 의 순서로 나타난다
⑧ 각각의 밴드의 Rf 값을 구한다
Rf =특정색소가 이동한 거리/전개액이 이동한 거리
6. Result
색소
이동거리 (mm)
RF 값
비고(밴드의 색등)
전개용매
58
1
연노랑
엽록소 b
10
10/58
노랑
엽록소 a
12
12/58
연두
Carotene
25
25/58
초록색
Xanthophyll
37
37/58
노란색
7. Discussion
이번 實驗(실험)은 비교적 쉬운 實驗(실험)이었다. 가장 주의 해야 될 점은 實驗(실험)
다.
chromatography 는 고정상과 이동상으로 구성된다 paper chromatography 에서는 여과지 표면에
흡착되어 있는 물이 고정상이며 전개액으로 사용되는 유기용매가 이동상이 된다
acetone 에 녹아있는 색소 혼합물은 모세관현상에 의해 전개액을 따라 여과지를 이동할 때 물(고정상)
과 전개액(이동상) 에 녹는 비에 따라 이동 속도에 차이가 난다.
